ELISA中有三個(gè)必要的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等

　　完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：

　　1.已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)

　　2.酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);

　　3.酶的底物;

　　4.陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中)，參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);

　　5.結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;

　　6.洗滌液

　　7.酶反應(yīng)終止液。

　　ELISA試劑盒操作步驟：

　　1. 加標(biāo)準(zhǔn)品：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，依次加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50ul(建議每個(gè)濃度做2個(gè)平行孔)

　　2. 加樣：分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品40μl，然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

　　3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

　　4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

　　5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

　　6. 加酶：除空白孔外每孔加入酶標(biāo)試劑50μl。

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